一、定義與區(qū)別 1. 質(zhì)量過載(Mass Overload) 定義:樣品中被分析組分的總質(zhì)量超出色譜柱(固定相)的載量(即柱能容納的最大樣品量),導(dǎo)致固定相無法有效分離全部組分。 表現(xiàn):色譜峰前沿拖尾、峰變寬、分離度降低,嚴(yán)重時(shí)多組分合并(“板塊飽和”),主要是因分析物與固定相的作用飽和。 2. 體積過載(Volume Overload) 定義:樣品進(jìn)樣體積過大,超過色譜柱和系統(tǒng)的“樣品區(qū)/進(jìn)樣區(qū)”承載能力(即進(jìn)樣區(qū)過長),導(dǎo)致樣品帶擴(kuò)展,影響分離。 表現(xiàn):色譜峰變寬、峰后沿展寬(拖尾)、峰形變差,分離度下降,甚至組分交疊,很大程度上與進(jìn)樣方法及樣品稀釋度有關(guān)。 二、體積過載和質(zhì)量過載的比較 項(xiàng)目 質(zhì)量過載 體積過載 影響參數(shù) 上樣組分的量 上樣的體積 機(jī)制 固定相吸附能力被飽和 樣品帶擴(kuò)展,分布過寬 典型峰形 前沿拖尾,峰寬變寬 后沿拖尾,峰寬變寬 主要影響 保留容量、線性、分離度、定量 分辨率差、實(shí)際進(jìn)樣靈敏度下降 應(yīng)用場景 高濃度樣品、制備色譜更常見 稀釋樣品進(jìn)樣量大、不合理進(jìn)樣 三、具體表現(xiàn)與原理 質(zhì)量過載(見制備色譜、濃縮分析物) 色譜柱作用位點(diǎn)有限,樣品組分多,部分僅穿過不被保留。 峰形變寬,前沿拖尾(前面洗脫的多,為“樣品先占位”)。 柱效率(塔板數(shù))下降,難高精度定量。 體積過載 因樣品體積太大,樣品帶過長,樣品從進(jìn)樣端分布到柱前段,使后出的樣品峰后沿拖尾。 分離度變差,特別是相鄰遇到椅型峰峰間重疊。 樣品稀釋度高時(shí)尤其突出。 |